转移摇床

时间:2024-07-21 22:18:33编辑:阿星

摇床有哪些用途

摇床的用途是用于通过摇动来混合或搅动管子、烧瓶中的物质。它主要用于化学和生物学领域,摇床包含一个振荡板,用于放置烧瓶、烧杯或试管。虽然最近磁力搅拌器取代了振动器,但在处理大体积物质或需要同时搅拌时,它仍然是首选设备。摇床的类型:1. 平台摇床。平台振动台有一个水平摆动的台板,待搅拌的液体放在放在桌子上方的烧杯、广口瓶或锥形烧瓶中,有时也放在嵌套在盘子孔中的试管或小瓶中。平台振动器还可以与其他系统结合使用,例如用于小型系统的旋转混合器,并且设计为在实验室中使用开源科学设备制造。2. 轨道摇床。轨道振动器具有低速(25-500 rpm)的圆形振动运动,它适用于培养微生物、洗涤印迹和一般混合。它的一些特点是它不会产生振动,与其他种类的振动器相比,它产生的热量低,这使其成为培养微生物的理想选择。此外,由于其低温和振动,它可以通过将其放置在培养箱中进行修改以创建培养箱摇床。3. 培养箱摇床。培养箱摇床(或热摇床)可以被认为是培养箱和摇床的混合体,它能够在保持最佳条件的同时摇晃,以培养微生物或 DNA 复制。该设备非常有用,因为为了使细胞生长,它需要需要摇动的氧气和营养物质,以便它们可以均匀地分布在培养物周围。

摇床的作用有哪些

摇床的作用为搅拌溶液。摇床是一种选分精确性很高的细粒、微细粒物料的分选设备,在选分低品位钨、锡矿石时,富集比可高达300倍;选别效率一般较其它细粒重选设备为高。主要用于选别钨、锡、钽、铌、铬和其它有色、稀有金属以及贵金属矿石,也可用来选别铁、锰矿石和煤。摇床的作用机理是原料送入给矿槽内,同时加水调配成浓度约25%到30%的矿浆,自动流到床面上。矿粒群在床条沟内因受水流冲洗和摇动作用产生松散、分层。分层后的上下层矿粒受到不同大小的水流动压力和床面摩擦力作用,而沿不同方向运动。作用作用是汉语词汇,意思是某种对象在某个时间或无某个空间或无的某个过程中,作为手段、工具,最终达成的效果。对事物产生影响,外界事物作用于人的感觉器官,从而产生印象。对人或事物产生的影响、效果,消极作用,带头作用。所有使结构产生力或者位移变形的因素。作用的名言有,我现在才懂得,年青人总是偏好推崇历史上出类拔萃的英雄,而忽视平民百姓在历史进程中的推动作用。多少世纪以来,人民的作用被遗忘了,他们不可磨灭的丰功伟绩被歪曲了。

脱色摇床的操作方法

操作步骤:1将仪器平稳放在工作台上。2插上电源,打开电源开关。3将所需震荡物质放入仪器震荡平台上。4从小到大调节所需的震荡频率。5如需定时设定,设定在适合状态。6工作完毕、关闭电源并拔出电源,清洁台面。注意事项:1需震荡的物质盖好瓶盖,放置倒到仪器震荡平面上。2震荡前排除可能会碰到的物体。3清洁:每月定时用酒精擦洗仪器。【摘要】
脱色摇床的操作方法【提问】
操作步骤:1将仪器平稳放在工作台上。2插上电源,打开电源开关。3将所需震荡物质放入仪器震荡平台上。4从小到大调节所需的震荡频率。5如需定时设定,设定在适合状态。6工作完毕、关闭电源并拔出电源,清洁台面。注意事项:1需震荡的物质盖好瓶盖,放置倒到仪器震荡平面上。2震荡前排除可能会碰到的物体。3清洁:每月定时用酒精擦洗仪器。【回答】


脱色摇床做什么用的

在细胞的培养中少不了需要用到脱色摇床,它可以可以上下摇动,整体做旋转晃动,使得细胞得到均匀的脱色或者染色!脱色摇床是指台式小型,用于蛋白电泳的脱色过程,一般只有很低的转速,是开发性的,体积相对较小脱色摇床是一种工作方式为摇摆式的摇床,在同类产品中技术较先进,具有质量可靠,运行平稳,噪音小,无级调速等特点,是生化、生物工程、教学、微生物及医学等行业研究和生产中的优选设备。脱色摇床主要是指跑电泳时染色、脱色,还有细胞培养等需要的,其主要就是较小,而且上面的台面一般是平的,做水平回旋(现在也有一些可以上下摇动,整体做旋转晃动,这样摇晃的均匀度和一致性比较好)。采用永磁直流电机作为动力,通过先进的电子调速电路,能够保持较为平稳的运动速度,同时具有使用寿命长,维护简单,操作方便的优点。


求助:感受态细胞在反复冻融后还能不能用

方法一:细菌转化的方法多以Mendel和Higa(1970)的发现为基础,其基本方法是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌,使之进入感受态得以转化。用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如大肠杆菌DH52),或1ml新鲜的16~20h过夜培养物,转到一个含有100mlLB培养基的1L或500ml烧瓶中。于37℃剧烈振摇培养约2~3h(旋转摇床200~300r/min),每隔20~30min测量OD600值≈0.4。2.在无菌条件下将细菌转移到一个,用冰预冷的50ml聚丙烯离心管中,在冰上放置10~20min。3.于4℃用SorvallGS2转头(或与其离心管相配的转头)以4000r/min离心10min,以回收细胞。4.倒数培养液,将管倒置1min以使最后残留的痕量培养液流尽。5.以10ml用冰预冷的0.1mMCaCl2重悬每份沉淀,放于冰上。6.于4℃用SorvallGS3转头(或与其相应的转头)以4000r/min离心10min,以回收细胞。7.倒出培养液,将管倒置1min以使最后残留的痕量培养液流尽。8.每50ml初始培养物用2ml冰预冷的0.1MCaCl2重悬每份沉定,此时,可以迅速将细胞分装成小份,液氮中冰冻,-70℃贮存备用。9.用冷却的无菌吸头从每种感受态细胞悬液中各取200μl转移到无菌的微量离心管中,每管加DNA或连接反应混合物(体积≤10μl,DNA≤50ng),轻轻旋转以混匀内容物,在冰中放置30min。10.将离心管放到预加温到40℃的循环水浴中的试管架上,放置90s~2min,不要摇动试管。11.快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1~2min。12.每离心管加800μlSOC培养基,用水浴将培养基加温到37℃,然后将管转移到37℃摇床上,温育45min使细菌复苏,并且表达质粒编码的抗生素抗性标记基因。13.将适当体积(每个90mm平板可达200μl)已转化的感受态细胞转移到含200mmol/lMgSO4和相应抗生素的SOB培养基上。14.将平板置于室温至液体被吸收。15.倒置平皿,于37℃培养,12~16h后可出现菌落。方法二:CASsuperOne-StepCompetentCellPrepsKit采用一种简单便捷的方法处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞,便于质粒DNA的转化,可满足一般实验的要求。与CaCl2法相比具有多种优点:使用方便,只需一步即可完成感受态细胞的制备;转化效率略高于CaCl2法,一般可达106-108cfu/μg,满足一般实验需要;感受态细胞制成后即可保存于-70℃,无须加入甘油,并且经长期保存活力无明显下降。准备工作:1.从液氮或低温冰箱中取出的大肠杆菌冻存菌,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落。挑形态饱满的单菌落2个,分别接种5mlLB培养基中,37℃,250rpm,过夜培养。2.次日从5mlLB培养物吸取200μl转入50mlLB培养基中(250ml锥形瓶),37℃,250rpm培养2小时,此时OD600约0.4—0.5。感受态细胞的制备:3.吸取1ml菌液到1.5ml离心管里,5000rpm离心5分钟,弃去上清。4.加入100μl预冷的SolutionA,悬浮菌体,冰浴30分钟。5.此时感受态细胞已经制成可立即使用或-70℃保存。细胞转化:6.在感受态细胞中加入100pg-10ngDNA,混匀,冰浴30分钟,然后42℃1分钟热击,再次冰浴2分钟。加入0.9mlLB培养基,20μlSolutionB,37℃,振荡培养1小时。7.取适当菌液(100-200μl)涂布相应抗性的平板。8.过夜培养约16个小时,数菌落数,计算转化率。补充说明:1.所用器具一定要清洁;2.操作步骤2中培养基的装量也是很重要的,建议装量不要高于此值:500ml锥形瓶装100ml培养基,250ml锥形瓶装50ml培养基;3.在收获菌体前半小时还可以在培养基中加入20mM的MgCl2,效果会更好一些;4.为保证细胞处于对数生长期,培养后的菌体的OD值不要高于0.6;5.制备感受态细胞时所有操作尽量保证在冰上操作;6.细胞转化操作步骤6中也可以不必进行热击,冰浴后直接加入新鲜LB,简化操作步骤,但转化效率低于热击方法,适用于对转化率要求不高的实验。方法三:1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2mlLB培养基的试管中,37℃振荡培养过夜2、取0.1ml过夜培养物转种于含10mlLB培养基的三角瓶中,37℃振荡培养3h至OD600=0.3ml离心管中,冰浴10min。4、在4℃下以4000rpm离心5min,去上清液5、把菌体悬浮于15m1冰冷的0.1MCaCl2溶液中,置冰上30min6、然后再在4℃下以4000rpm离心10min,去上清液7、将菌体悬浮于0.1mlCaCl2溶液中,冰浴放置4-12hr备用。方法四:(1)将1ml过夜培养的细菌(如DH52、TG1、TM101)接种于100ml2×YT培养于500ml烧瓶。于37℃刷烈振荡,通常≥200rpm培养的细菌密度约OD550=0.2~0.5(5×107cells/ml),需2~4h。(2)将培养物放于冰上致冷10min,于4℃离心细菌培养物,10000rpm离心10min。(3)弃除上清,将细菌悬浮于原始培养体积的一半(约50ml)的50mMCaCl2和10mmTris·HCl(pH8.0)无菌冷冻液体中。(4)将细菌悬浮放在冰上约5min,然后将悬浮物于4℃10000/rpm离心10min。(5)弃上清,悬浮细菌于原始培养体积的1/15的50mMCaCl和10mMTris·HCl(pH8.0)无菌冷冻中。此时的细胞是感受态细胞,即可用于转化。200μl分装于无菌的1.5ml微量离心管中,贮存于-80℃冰箱中。方法五:TSB法(也是本人热衷的方法)1.药品制备1MMg2+(1MMgSO4和1MMgCl2等体积混合),用0.22um滤膜超滤除菌。TSB液(30mL/80mL菌液)(现配现用):PEG33503gTryptone0.3gYeastextract0.15gNaCl0.3g2.步骤:(1)活化菌株(2)挑单菌落培养于5mL的液笨培养基中(3)取液体培养物50uL于80mL的液体培养基中进行扩大培养(4)370C培养3-4小时,OD600在0.4-0.6(5)离心,去上清(6)加入20mLTSB,重悬(7)离心,去上清(8)加入10mLTSB,再加入15-20%的甘油,分装保存注,整个操作过程均应在冰上进行。所用药品均需灭菌。转化程序(1)取出200μl感受态细胞慢慢使其溶化,并立即放于冰上,加入DNA或连接反应混合物,DNA量通常≤50mg。用手指弹打试管10次,使之混匀,然后放在冰上40~45min。(2)将管放于42℃水浴中2min。(3)然后每管直接加入1.0ml2×YT培养基,倒置混匀,并于37℃培养8~12h,干浴或水浴,不需振摇。此期间使细菌生长并开始表达抗菌素。(4)每200μl转化混合物分别于6个2×YT琼脂培养板上补充相应抗生素,并含有X-gal(20mg/ml)、IPTG(200mg/ml)。


感受态细胞用前离心了一下 会破坏细胞吗

细菌转化的方法多以Mendel和Higa(1970)的发现为基础,其基本方法是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌,使之进入感受态得以转化。
用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。
1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如大肠杆菌DH52),或1ml新鲜的16~20h过夜培养物,转到一个含有100mlLB培养基的1L或500ml烧瓶中。于37℃剧烈振摇培养约2~3h(旋转摇床200~300r/min),每隔20~30min测量OD600值≈0.4。 2.在无菌条件下将细菌转移到一个,用冰预冷的50ml聚丙烯离心管中,在冰上放置10~20min。
3.于4℃用SorvallGS2转头(或与其离心管相配的转头)以4000r/min离心10min,以回收细胞。
4.倒数培养液,将管倒置1min以使最后残留的痕量培养液流尽。 5.以10ml用冰预冷的0.1mMCaCl2重悬每份沉淀,放于冰上。
6.于4℃用SorvallGS3转头(或与其相应的转头)以4000r/min离心10min,以回收细胞。
7.倒出培养液,将管倒置1min以使最后残留的痕量培养液流尽。
8.每50ml初始培养物用2ml冰预冷的0.1M CaCl2重悬每份沉定,此时,可以迅速将细胞分装成小份,液氮中冰冻,-70℃贮存备用。
9.用冷却的无菌吸头从每种感受态细胞悬液中各取200μl转移到无菌的微量离心管中,每管加DNA或连接反应混合物(体积≤10μl,DNA≤50ng),轻轻旋转以混匀内容物,在冰中放置30min。
10.将离心管放到预加温到40℃的循环水浴中的试管架上,放置90s~2min,不要摇动试管。
11.快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1~2min。 12.每离心管加800μlSOC培养基,用水浴将培养基加温到37℃,然后将管转移到37℃摇床上,温育45min使细菌复苏,并且表达质粒编码的抗生素抗性标记基因。 13.将适当体积(每个90mm平板可达200μl)已转化的感受态细胞转移到含200mmol/l MgSO4和相应抗生素的SOB培养基上。 14.将平板置于室温至液体被吸收。
15.倒置平皿,于37℃培养,12~16h后可出现菌落。


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