正相色谱和反相色谱的区别是什么？
1、固定相不同：正相硅胶具有极性基的表面，而反相硅胶是经过改性，表面键合烷基链（例如 C-18），极性更小，因此对极性化合物有较小的保留。2、适用的样品类型不同：由于反相条件下，修饰了硅胶表面的羟基，使其极性降低，使得其适用性变得更加宽广（相对比反相而言），各类极性的大小分子，天然产物，都可以在反相体系中得到有效分离。3、流动相不同：正相色谱，因为硅胶表面的硅羟基极性大，极性大的水溶性化合物很难被洗脱下来，只有使用更强极性的溶剂才能成功。在反相色谱中，因为极性化合物和固定相的吸附性较小，因此用较小极性的溶剂，就可以实现比较理想的洗脱效果。扩展资料：注意事项：避免压力和温度的急剧变化：温度突变或使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况，柱压突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。勿直接改变溶剂组成：改变溶剂的组成时，应逐渐缓慢改变，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。禁止反冲：一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。参考资料来源：百度百科-正相色谱参考资料来源：百度百科- 反相色谱
何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?
在液-固吸附色谱,液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱.液-固吸附色谱（固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的.吸附作用越强,K值越大,保留时间越长）液-液分配色谱（是将固定液涂在担体上作为固定相的,它的分离原理与液液萃取的原理相同,从而服从分配定律.在固定液中溶解度大,K值大,保留时间长）.
正相色谱是指流动相的极性小于固定相的极性；反正色谱是指流动相的极性大于固定相的极性.
对于反相色谱,极性越小的物质,流动相的极性越大,保留时间越长.极性越小的物质,流动相的极性越小,保留时间越短.对于极性大的物质来说,流动相的极性对其保留时间影响较小.而正相色谱正好相反.
因此在应用上正相色谱用于分离极性较大的物质,如蛋白质、生物碱等.反相色谱多用于分离极性较小的物质,在流动相的选择上,反相色谱的优势更大,在实际工作中反相色谱的应用更为广泛
